現(xiàn)代生物制藥工藝學(xué)(辛秀蘭)(第二版)
《現(xiàn)代生物制藥工藝學(xué)》的內(nèi)容包括天然生物材料的提取制藥、發(fā)酵工程制藥、細(xì)胞工程制藥、酶工程制藥和基因工程制藥5個(gè)項(xiàng)目。天然生物材料的提取制藥項(xiàng)目設(shè)計(jì)了L-胱氨酸的制備、胰凝乳蛋白酶的制備、 核苷酸的制備、 溶菌酶的制備、甘露醇的制備、卵磷脂的制備6個(gè)工作任務(wù),發(fā)酵工程制藥項(xiàng)目設(shè)計(jì)了青霉素的發(fā)酵生產(chǎn)、紅霉素的發(fā)酵生產(chǎn)、金霉素的發(fā)酵生產(chǎn)、鏈霉素的發(fā)酵生產(chǎn)、維生素C的發(fā)酵生產(chǎn)、谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)6個(gè)工作任務(wù),細(xì)胞工程制藥項(xiàng)目設(shè)計(jì)了骨髓瘤細(xì)胞SP2/0的傳代培養(yǎng)、SP2/0細(xì)胞傳代培養(yǎng)的常規(guī)檢測(cè)、抗人血蛋白雜交瘤細(xì)胞系的建立、雜交瘤陽(yáng)性克隆子的保藏、雜交瘤陽(yáng)性克隆子的微載體培養(yǎng)、西洋參植物細(xì)胞的培養(yǎng)6個(gè)工作任務(wù),酶工程制藥項(xiàng)目設(shè)計(jì)了胃蛋白酶的制備及酶活力測(cè)定、門(mén)冬酰胺酶的制備及酶活力測(cè)定、糖化酶的制備及酶活力測(cè)定、糖化酶的固定化、中性蛋白酶的固定化、胰蛋白酶親和色譜6個(gè)工作任務(wù),基因工程制藥項(xiàng)目設(shè)計(jì)了葡激酶的制備、γ干擾素的制備、重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165的制備、胰島素的制備、人血白蛋白的制備、卡介苗重組疫苗的制備6個(gè)工作任務(wù)。教材的知識(shí)與目標(biāo)設(shè)計(jì)和微生物發(fā)酵工、生物分離提取工、藥物制劑工等國(guó)家職業(yè)大典規(guī)定的職業(yè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)應(yīng),注重內(nèi)容的科學(xué)性、實(shí)用性。
本教材適合高職高專院校生物技術(shù)、生物制藥等專業(yè)使用,也可作為行業(yè)培訓(xùn)用書(shū)和生物制藥技術(shù)人員的參考用書(shū)。
適讀人群 :本教材適合高職高專院校生物技術(shù)、生物制藥等專業(yè)使用,也可作為行業(yè)培訓(xùn)用書(shū)和生物制藥技術(shù)人員的參考用書(shū)。
1.本書(shū)內(nèi)容來(lái)源于生產(chǎn)一線,以企業(yè)的實(shí)際生產(chǎn)任務(wù)為主線編寫(xiě);
2.書(shū)中知識(shí)與能力目標(biāo)設(shè)計(jì)與國(guó)家職業(yè)大典規(guī)定的職業(yè)標(biāo)準(zhǔn)相對(duì)應(yīng);
3.編寫(xiě)團(tuán)隊(duì)由企業(yè)專家和院校專任教師共同組成,保證教材更貼近生產(chǎn)實(shí)際。
前言
現(xiàn)代生物制藥工藝學(xué)是生物技術(shù)、生物制藥類專業(yè)的必修課程之一。本書(shū)版出版于2006年8月,已重印數(shù)次,被國(guó)內(nèi)大部分開(kāi)設(shè)生物制藥相關(guān)課程的高職高專院校采用,發(fā)行量達(dá)3萬(wàn)多冊(cè)。編者利用所掌握的大量來(lái)源于生產(chǎn)實(shí)際的一線資料,以企業(yè)的實(shí)際生產(chǎn)任務(wù)為主線對(duì)教材內(nèi)容進(jìn)行修訂,從而使教材更加滿足高職高專院校的人才培養(yǎng)需求。本教材的編寫(xiě)團(tuán)隊(duì)由企業(yè)專家和專任教師共同組成。在企業(yè)專家的參與下,更多來(lái)源于企業(yè)生產(chǎn)一線的知識(shí)和技能要求被提煉和總結(jié),并編寫(xiě)到教學(xué)項(xiàng)目、任務(wù)中,使教材的內(nèi)容更貼近生產(chǎn)實(shí)際。
為適應(yīng)職業(yè)教育教學(xué)方法改革的需要,教材的此次修訂改為項(xiàng)目化教學(xué)的體例,共設(shè)計(jì)了天然生物材料的提取制藥、發(fā)酵工程制藥、細(xì)胞工程制藥、酶工程制藥、基因工程制藥共5個(gè)教學(xué)項(xiàng)目、30個(gè)教學(xué)任務(wù)。教師可根據(jù)教學(xué)大綱和實(shí)驗(yàn)室的具體設(shè)備情況,靈活選擇具體的教學(xué)任務(wù),充分體現(xiàn)任務(wù)驅(qū)動(dòng)、項(xiàng)目導(dǎo)向的現(xiàn)代教學(xué)模式,從而提升學(xué)生的生產(chǎn)實(shí)踐能力。
教材的知識(shí)與能力目標(biāo)設(shè)計(jì)與微生物發(fā)酵工、生物分離提取工、藥物制劑工等國(guó)家職業(yè)大典規(guī)定的職業(yè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)應(yīng)。編者通過(guò)與各類企業(yè)廣泛溝通,了解企業(yè)生物藥物生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP),并將執(zhí)行法規(guī)和規(guī)范、環(huán)保和安全意識(shí)等生物制藥崗位所必需的職業(yè)素質(zhì)融于教學(xué)目標(biāo)中,以實(shí)現(xiàn)教學(xué)與崗位能力要求的對(duì)接。
為了使本書(shū)適應(yīng)行業(yè)發(fā)展以及高職高專教育的需要,我們參考了大量國(guó)內(nèi)外有關(guān)書(shū)籍和文獻(xiàn),并結(jié)合自己的教學(xué)實(shí)踐進(jìn)行編撰。其間得到了各位編寫(xiě)人員及所在單位的大力支持與配合,在此表示衷心的感謝。同時(shí)也對(duì)本教材版的各位編寫(xiě)人員所付出的辛勤努力表示感謝。由于作者水平有限,難免會(huì)有疏漏與不妥之處,敬請(qǐng)廣大讀者與同仁批評(píng)指正。
編者
2016年3月
版前言
生物制藥工藝學(xué)是高職生物技術(shù)應(yīng)用、制藥工程等工科專業(yè)和醫(yī)藥類專業(yè)的必修課程之一。目前,全國(guó)開(kāi)設(shè)生物技術(shù)類的高等職業(yè)院校共有200多所,絕大多數(shù)學(xué)校均開(kāi)設(shè)生物制藥工藝學(xué)課程,但目前適合于高等職業(yè)教育的生物制藥類教材卻鳳毛麟角,這種狀況既不適應(yīng)于社會(huì)對(duì)人才培養(yǎng)的要求,也不利于師生的教學(xué)。有鑒于此,本書(shū)的編者——這些在高等職業(yè)院校長(zhǎng)期從事生物制藥工藝學(xué)教學(xué)的教師希望通過(guò)自己的努力,為高職高專學(xué)生和教師提供一本簡(jiǎn)明、適用的生物制藥工藝學(xué)教材。
本教材堅(jiān)持理論知識(shí)“適度、夠用”的原則,強(qiáng)化學(xué)生的實(shí)際操作技能的訓(xùn)練,充分體現(xiàn)職業(yè)教育特色,教材以技能訓(xùn)練為核心,注重理論知識(shí)的系統(tǒng)性和實(shí)驗(yàn)操作的可行性。教材共分兩篇,篇為基礎(chǔ)理論,第二篇為實(shí)驗(yàn)技術(shù)。
基礎(chǔ)理論部分內(nèi)容覆蓋面廣,包括概述、天然生物材料的提取制藥、發(fā)酵工程制藥、細(xì)胞工程制藥、酶工程制藥和基因工程制藥六章內(nèi)容,便于不同專業(yè)的學(xué)生和教師有效利用,尤其突出各類制藥技術(shù)的工程實(shí)例,以適應(yīng)高職教育的要求。天然生物材料的提取制藥介紹從動(dòng)植物組織、微生物細(xì)胞等生物體中提取生化藥物的原則、操作原理和提取分離方法;發(fā)酵工程制藥以抗生素為主線,介紹了β內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類和氨基糖苷類等抗生素的發(fā)酵工藝控制和提取精制方法;細(xì)胞工程制藥主要介紹植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)方法,以及利用動(dòng)植物細(xì)胞進(jìn)行生物制藥的實(shí)例;酶工程制藥主要介紹酶的固定化技術(shù)及酶工程制藥實(shí)用技術(shù);基因工程制藥以實(shí)際應(yīng)用為主,先簡(jiǎn)單介紹基因工程制藥的實(shí)用技術(shù),然后從基因工程上游技術(shù)和下游技術(shù)兩個(gè)角度講解基因工程的實(shí)際應(yīng)用。
生物制藥是一門(mén)實(shí)驗(yàn)技術(shù),重點(diǎn)培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)際動(dòng)手能力。但傳統(tǒng)的高職生物制藥類教材均以理論為主導(dǎo),通過(guò)大生產(chǎn)的實(shí)際操作實(shí)例來(lái)闡明實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn),學(xué)生只能以“聽(tīng)實(shí)驗(yàn)”為主,而無(wú)法動(dòng)手實(shí)施,大大限制了學(xué)生技術(shù)應(yīng)用能力的培養(yǎng)。本書(shū)的第二篇實(shí)驗(yàn)技術(shù)共分五章,分別為天然生物材料的提取制藥實(shí)驗(yàn)、發(fā)酵工程制藥實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞工程制藥實(shí)驗(yàn)、酶工程制藥實(shí)驗(yàn)和基因工程制藥實(shí)驗(yàn),共設(shè)置了50個(gè)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的選擇以工業(yè)化大生產(chǎn)為依據(jù),但同時(shí)也兼顧了國(guó)內(nèi)大部分高職院校的實(shí)驗(yàn)和實(shí)訓(xùn)條件,對(duì)復(fù)雜的生物制藥工藝實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了改良,增加實(shí)驗(yàn)室小規(guī)模生物制藥實(shí)驗(yàn),增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室操作的可行性,利于培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力,各院?筛鶕(jù)實(shí)際情況靈活選用。
北京電子科技職業(yè)學(xué)院(原北京輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院)的辛秀蘭、蘭蓉、徐晶、吳志明,中國(guó)食品工業(yè)(集團(tuán))公司的江波,湖北荊門(mén)職業(yè)技術(shù)學(xué)院的陳可夫,浙江金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院的邵玲莉,安徽輕工業(yè)學(xué)校的劉純根,北京醫(yī)藥器械學(xué)校的勞文燕、張虎成,四川工商職業(yè)技術(shù)學(xué)院的江建軍、寧允葉,安徽合肥萬(wàn)博科技職業(yè)學(xué)院的姚振華等老師共同完成了本書(shū)的編寫(xiě)和審稿工作。為了使本教材適應(yīng)行業(yè)發(fā)展及高職教育的需要,我們參考了大量的國(guó)內(nèi)外有關(guān)文獻(xiàn),并結(jié)合自己的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行了編撰,但由于作者水平有限,難免會(huì)有錯(cuò)誤與不妥之處,敬請(qǐng)廣大讀者與同仁批評(píng)指正。
辛秀蘭
2006年4月
辛秀蘭,北京電子科技職業(yè)學(xué)院生物工程學(xué)院院長(zhǎng)、教授,北京市職教名師、北京市中青年骨干教師。主要研究方向?yàn)橹参锾烊换钚猿煞值难芯考吧镛D(zhuǎn)化。曾主持國(guó)家示范校生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè)重點(diǎn)專業(yè)建設(shè)項(xiàng)目、北京市生物技術(shù)專業(yè)職業(yè)教育分級(jí)制改革試點(diǎn)項(xiàng)目以及兩項(xiàng)北京市教委面上項(xiàng)目。生物技術(shù)團(tuán)隊(duì)被評(píng)為北京市屬市管高等學(xué)校學(xué)術(shù)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì),“依托企業(yè),推進(jìn)高職高專生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè)教學(xué)改革與實(shí)踐”獲得2008年北京市教育教學(xué)成果一等獎(jiǎng)。
項(xiàng)目一天然生物材料的提取制藥1
【項(xiàng)目介紹】1
【相關(guān)知識(shí)】2
一、生化藥物的分類2
二、生化藥物的一般工藝2
三、生化藥物在醫(yī)藥工業(yè)中的地位3
【項(xiàng)目思考】4
【項(xiàng)目實(shí)施】4
任務(wù)一L-胱氨酸的制備4
一、任務(wù)目標(biāo)4
二、必備基礎(chǔ)4
1.氨基酸類藥物的常用生產(chǎn)方法4
2.氨基酸類藥物的常用分離純化技術(shù)5
三、任務(wù)實(shí)施6
任務(wù)二胰凝乳蛋白酶的制備8
一、任務(wù)目標(biāo)8
二、必備基礎(chǔ)8
1.材料的預(yù)處理8
2.多肽和蛋白質(zhì)類藥物的提取9
3.多肽和蛋白質(zhì)類藥物的純化10
三、任務(wù)實(shí)施10
任務(wù)三核苷酸的制備11
一、任務(wù)目標(biāo)11
二、必備基礎(chǔ)11
1. DNA的提取與純化技術(shù)12
2. DNA的含量測(cè)定12
3. RNA的生產(chǎn)技術(shù)13
三、任務(wù)實(shí)施13
任務(wù)四溶菌酶的制備15
一、任務(wù)目標(biāo)15
二、必備基礎(chǔ)15
1.酶類藥物的分類15
2.藥用酶的制備方法17
3.藥用酶的常用提取純化方法17
三、任務(wù)實(shí)施18
任務(wù)五甘露醇的制備20
一、任務(wù)目標(biāo)20
二、必備基礎(chǔ)20
1.多糖的來(lái)源21
2.糖類藥物的生理活性21
3.多糖的提取純化方法23
三、任務(wù)實(shí)施24
任務(wù)六卵磷脂的制備25
一、任務(wù)目標(biāo)25
二、必備基礎(chǔ)25
1.脂類藥物的分類25
2.脂類藥物的常用生產(chǎn)方法26
三、任務(wù)實(shí)施27
參考文獻(xiàn)28
項(xiàng)目二發(fā)酵工程制藥29
【項(xiàng)目介紹】29
【相關(guān)知識(shí)】29
一、發(fā)酵工程制藥的研究范疇29
二、發(fā)酵工程制藥的工藝特點(diǎn)與要求30
三、發(fā)酵工程制藥與化學(xué)制藥的比較31
四、發(fā)酵工程藥物研究開(kāi)發(fā)的一般程序32
【項(xiàng)目思考】33
【項(xiàng)目實(shí)施】33
任務(wù)一青霉素的發(fā)酵生產(chǎn)33
一、任務(wù)目標(biāo)33
二、必備基礎(chǔ)33
1. β-內(nèi)酰胺類抗生素的發(fā)展背景33
2. β-內(nèi)酰胺類抗生素的分類和命名33
3. β內(nèi)酰胺類抗生素的性質(zhì)34
4.萃取與結(jié)晶實(shí)驗(yàn)技術(shù)34
三、任務(wù)實(shí)施37
任務(wù)二紅霉素的發(fā)酵生產(chǎn)41
一、任務(wù)目標(biāo)41
二、必備基礎(chǔ)41
1.大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的結(jié)構(gòu)、分類及藥理作用41
2.離子交換法和大孔樹(shù)脂吸附法42
三、任務(wù)實(shí)施44
任務(wù)三金霉素的發(fā)酵生產(chǎn)47
一、任務(wù)目標(biāo)47
二、必備基礎(chǔ)48
1.四環(huán)素類抗生素的活性48
2.四環(huán)素類抗生素的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)48
3.發(fā)酵液的預(yù)處理48
4.沉淀提取法49
5.溶劑萃取法49
6.減少差向異構(gòu)物的方法49
三、任務(wù)實(shí)施50
任務(wù)四鏈霉素的發(fā)酵生產(chǎn)52
一、任務(wù)目標(biāo)52
二、必備基礎(chǔ)52
1.氨基糖苷類抗生素的發(fā)展背景52
2.氨基糖苷類抗生素的藥理活性及性質(zhì)52
3.氨基糖苷類抗生素的分類53
4.活性炭吸附技術(shù)53
5.沉淀技術(shù)53
6.干燥技術(shù)54
三、任務(wù)實(shí)施55
任務(wù)五維生素C的發(fā)酵生產(chǎn)58
一、任務(wù)目標(biāo)58
二、必備基礎(chǔ)58
1.維生素C的基本知識(shí)58
2.維生素C的功效58
3.超濾技術(shù)59
三、任務(wù)實(shí)施61
任務(wù)六谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)63
一、任務(wù)目標(biāo)63
二、必備基礎(chǔ)63
1.氨基酸的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及應(yīng)用63
2.氨基酸在食物營(yíng)養(yǎng)等方面的作用64
3.等電點(diǎn)沉淀法64
三、任務(wù)實(shí)施65
參考文獻(xiàn)66
項(xiàng)目三細(xì)胞工程制藥67
【項(xiàng)目介紹】67
【相關(guān)知識(shí)】68
一、動(dòng)物細(xì)胞工程68
二、植物細(xì)胞工程71
【項(xiàng)目思考】72
【項(xiàng)目實(shí)施】72
任務(wù)一骨髓瘤細(xì)胞SP2/0的傳代培養(yǎng)72
一、任務(wù)目標(biāo)72
二、必備基礎(chǔ)72
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的重要性72
2.動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)條件及營(yíng)養(yǎng)需求72
3.動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)前的準(zhǔn)備74
4.動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)的方法75
三、任務(wù)實(shí)施75
任務(wù)二SP2/0細(xì)胞傳代培養(yǎng)的常規(guī)檢測(cè)76
一、任務(wù)目標(biāo)76
二、必備基礎(chǔ)77
1.細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)的常規(guī)項(xiàng)目77
2.微生物污染的檢測(cè)方法77
3.預(yù)防污染79
三、任務(wù)實(shí)施79
任務(wù)三抗人血蛋白雜交瘤細(xì)胞系的建立80
一、任務(wù)目標(biāo)80
二、必備基礎(chǔ)80
1.動(dòng)物細(xì)胞融合的概念80
2.細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展歷史80
3.雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的原理81
4.雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的主要過(guò)程81
三、任務(wù)實(shí)施82
任務(wù)四雜交瘤陽(yáng)性克隆子的保藏84
一、任務(wù)目標(biāo)84
二、必備基礎(chǔ)84
1.動(dòng)物細(xì)胞的凍存84
2.細(xì)胞的復(fù)蘇84
3.細(xì)胞活性檢查85
4.細(xì)胞計(jì)數(shù)85
三、任務(wù)實(shí)施85
任務(wù)五雜交瘤陽(yáng)性克隆子的微載體培養(yǎng)86
一、任務(wù)目標(biāo)86
二、必備基礎(chǔ)86
1.動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)86
2.動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法86
3.動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器88
4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式88
5.動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的應(yīng)用88
三、任務(wù)實(shí)施88
任務(wù)六西洋參植物細(xì)胞的培養(yǎng)90
一、任務(wù)目標(biāo)90
二、必備基礎(chǔ)90
1.植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的重要性90
2.植物細(xì)胞培養(yǎng)條件及營(yíng)養(yǎng)需求90
3.植物細(xì)胞培養(yǎng)前準(zhǔn)備91
4.植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)91
三、任務(wù)實(shí)施92
參考文獻(xiàn)94
項(xiàng)目四酶工程制藥95
【項(xiàng)目介紹】95
【相關(guān)知識(shí)】96
一、酶的基本知識(shí)96
二、酶工程的基本知識(shí)98
三、藥用酶的生產(chǎn)方法98
【項(xiàng)目思考】100
【項(xiàng)目實(shí)施】100
任務(wù)一胃蛋白酶的制備及酶活力測(cè)定100
一、任務(wù)目標(biāo)100
二、必備基礎(chǔ)100
1.胃蛋白酶的組成、性質(zhì)與保存100
2.酶活力測(cè)定方法101
三、任務(wù)實(shí)施101
任務(wù)二門(mén)冬酰胺酶的制備及酶活力測(cè)定102
一、任務(wù)目標(biāo)102
二、必備基礎(chǔ)103
1.門(mén)冬酰胺酶的性質(zhì)與用途103
2.酶的微生物發(fā)酵生產(chǎn)103
三、任務(wù)實(shí)施105
任務(wù)三糖化酶的制備及酶活力測(cè)定106
一、任務(wù)目標(biāo)106
二、必備基礎(chǔ)106
1.糖化酶的特性106
2.糖化酶的產(chǎn)品規(guī)格106
3.糖化酶的使用方法和參考用量106
4.使用糖化酶的優(yōu)點(diǎn)107
5.糖化酶使用注意事項(xiàng)107
6.糖化酶的運(yùn)輸與貯存107
三、任務(wù)實(shí)施107
任務(wù)四糖化酶的固定化109
一、任務(wù)目標(biāo)109
二、必備基礎(chǔ)109
1.固定化酶的概念109
2.固定化酶的實(shí)驗(yàn)技術(shù)110
3.固定化酶的應(yīng)用114
4.固定化酶的研究前景115
三、任務(wù)實(shí)施115
任務(wù)五中性蛋白酶的固定化117
一、任務(wù)目標(biāo)117
二、必備基礎(chǔ)117
1.蛋白酶的基礎(chǔ)知識(shí)117
2.中性蛋白酶的基礎(chǔ)知識(shí)117
3.蛋白酶固定化常用的材
料——海藻酸鈉118
三、任務(wù)實(shí)施120
任務(wù)六胰蛋白酶親和色譜122
一、任務(wù)目標(biāo)122
二、必備基礎(chǔ)122
1.親和色譜技術(shù)122
2.其他分離技術(shù)123
三、任務(wù)實(shí)施127
參考文獻(xiàn)128
項(xiàng)目五基因工程制藥130
【項(xiàng)目介紹】130
【相關(guān)知識(shí)】130
一、基因工程技術(shù)的優(yōu)勢(shì)130
二、基因工程制藥的發(fā)展史131
三、基因工程制藥的特點(diǎn)133
四、基因工程藥物的種類133
五、基因工程技術(shù)中的基本概念134
六、基因工程藥物生產(chǎn)的基本過(guò)程136
七、基因工程制藥實(shí)用技術(shù)137
【項(xiàng)目思考】139
【項(xiàng)目實(shí)施】140
任務(wù)一葡激酶的制備140
一、任務(wù)目標(biāo)140
二、必備基礎(chǔ)140
1.葡激酶的基本知識(shí)140
2.目的基因的獲得140
3.重組體的構(gòu)成、導(dǎo)入和篩選141
4. DNA重組體轉(zhuǎn)入宿主菌142
5.重組子的篩選與鑒定142
6.重組體在宿主細(xì)胞中的表達(dá)、調(diào)控及檢測(cè)142
三、任務(wù)實(shí)施143
任務(wù)二γ干擾素的制備150
一、任務(wù)目標(biāo)150
二、必備基礎(chǔ)150
1.干擾素的基本知識(shí)150
2.真核細(xì)胞中目標(biāo)基因的提取150
3. RT-PCR技術(shù)150
4. T質(zhì)粒載體151
三、任務(wù)實(shí)施152
任務(wù)三重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165的制備157
一、任務(wù)目標(biāo)157
二、必備基礎(chǔ)157
1.生長(zhǎng)因子的基本知識(shí)157
2.畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)157
三、任務(wù)實(shí)施158
任務(wù)四胰島素的制備160
一、任務(wù)目標(biāo)160
二、必備基礎(chǔ)160
胰島素的基本知識(shí)160
三、任務(wù)實(shí)施161
任務(wù)五人血白蛋白的制備162
一、任務(wù)目標(biāo)162
二、必備基礎(chǔ)162
三、任務(wù)實(shí)施162
任務(wù)六卡介苗重組疫苗的制備163
一、任務(wù)目標(biāo)163
二、必備基礎(chǔ)163
1.病毒載體的基本知識(shí)163
2.疫苗的基本知識(shí)163
3.重組卡介苗的基本知識(shí)164
三、任務(wù)實(shí)施165
參考文獻(xiàn)166