生物檢測是近年來高速發(fā)展的學科之一!渡餀z測技術》(作者陳朝銀、趙聲蘭)以現代生物工程技術為主線,系統(tǒng)介紹了生物過程及其生物產品的理化性質、功效與代謝等分析檢測的原理、技術、手段、方法、應用及發(fā)展。主要內容包括基因及基因組學、蛋白質及蛋白質組學、次生活性成分、酶、細胞、功效與代謝、生物安全性評價等的分析檢測技術,以及生物傳感器及生物芯片技術。內容系統(tǒng)、新穎,具有較強的集成性和實用性!渡餀z測技術》可作為綜合性院校、農林院校、師范院校、醫(yī)學院校等相關專業(yè)的本科生、研究生的教材和教學參考書,也可作為相關科研和教學工作者的參考用書。
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目錄
前言
第1章 基因及基因組學檢測技術 1
1.1 核酸制品的理化指標及其檢測 1
1.1.1 核酸分離純化的原則 1
1.1.2 核酸分離純化的技術路線 2
1.1.3 基因組DNA的分離與純化 3
1.1.4 質粒DNA的分離與純化 4
1.1.5 RNA的分離與純化 4
1.1.6 全白動核酸提取純化工作站 5
1.2 DNA的變性與復性及其Tm值和Cot值測定 6
1.2.1 DNA變性及其Tm值的意義與測定 6
1.2.2 DNA復性及其Cot值的意義和測定 7
1.2.3 核酸雜交分析及核酸探針技術 8
1.3 常規(guī)PCR原理與步驟 9
1.3.1 PCR的基本原理 9
1.3.2 操作過程 9
1.3.3 熱穩(wěn)定性DNA聚合酶 10
1.3.4 PCR引物的設計 10
1.3.5 PCR擴增的模板 10
1.3.6 常規(guī)的PCR擴增方案 10
1.4 實時熒光定量PCR檢測技術 11
1.4.1 CT值 12
1.4.2 熒光信號和定量數據的歸一化 14
1.4.3 污染的預防和熱啟動 14
1.4.4 標準 14
1.4.5 TaqMan探針技術原理 15
1.4.6 SYBR Green I熒光染料 15
1.4.7 定量PCR儀 16
1.5 其他非常規(guī)擴增技術 16
1.6 核酸的序列測定技術 18
1.6.1 雙脫氧末端終止法測序 18
1.6.2 全自動測序 20
1.6.3 測序策略 21
1.6.4 高通量測序 22
1.7 基因組學檢測技術 24
1.7.1 結構基因組學檢測技術 24
1.7.2 功能基因組學檢測技術 25
1.7.3 比較基因組學檢測技術 26
1.7.4 宏基因組學檢測技術 26
主要參考文獻 27
第2章 蛋白質及蛋白質組學檢測技術 28
2.1 蛋白質的理化性質 29
2.2 蛋白質一級結構測定 31
2.2.1 水解分析 31
2.2.2 蛋白質分子中末端氨基酸的分析 32
2.2.3 質譜測序 34
2.2.4 蛋白質的非共價復合物研究 35
2.3 蛋白質高級結構分析測定 35
2.3.1 儀器分析方法 35
2.3.2 理論分析方法 37
2.4 蛋白質組學檢測技術 46
2.4.1 電泳分析法 47
2.4.2 層析技術 47
2.4.3 質譜技術 48
2.4.4 蛋白質修飾及其分析方法 52
主要參考文獻 55
第3章 酶檢測技術 56
3.1 基礎酶學檢測技術 56
3.1.1 酶反應的解析 56
3.1.2 酶學常數測定 57
3.2 應用酶學檢測技術 66
3.2.1 酶產品質檢 66
3.2.2 酶法檢測 79
3.2.3 常見酶活力測定方法 85
主要參考文獻 103
第4章 次生活性成分檢測技術 104
4.1 生物堿 104
4.1.1 生物堿的分類 104
4.1.2 生物堿的理化性質 105
4.1.3 生物堿的提取分離 106
4.1.4 生物堿定性鑒別 109
4.1.5 生物堿的含量測定 111
4.2 醌類化合物 114
4.2.1 醌類化合物的主要理化特性 115
4.2.2 醌類化合物的提取分離 116
4.2.3 醌類化合物的定性鑒別 117
4.2.4 醌類化合物的含量測定 119
4.2.5 蒽醌類化合物的結構測定 120
4.3 黃酮類化合物 123
4.3.1 黃酮類化合物的主要理化特性 123
4.3.2 黃酮類化合物的分離 123
4.3.3 黃酮類化合物的定性鑒別 125
4.3.4 黃酮類化合物的定量分析 127
4.4 香豆素和木脂素類 130
4.4.1 香豆素類成分的主要理化性質 130
4.4.2 香豆素類的提取分離 131
4.4.3 香豆素類的檢識 132
4.4.4 木脂素類的理化性質 132
4.4.5 木脂素類的提取分離 132
4.4.6 木脂素類的檢識 133
4.5 皂苷類 133
4.5.1 皂苷的性質 133
4.5.2 皂苷的提取分離 134
4.5.3 皂苷類成分的定性分析 135
4.5.4 皂苷類成分的定量分析 136
4.6 強心苷類 137
4.6.1 強心苷類的主要性質 137
4.6.2 強心苷類的檢識反應 139
4.6.3 強心苷類的提取分離 140
4.7 揮發(fā)油 141
4.7.1 揮發(fā)油的主要性質 141
4.7.2 揮發(fā)油成分的提取 141
4.7.3 揮發(fā)油成分的分離 142
4.7.4 揮發(fā)油的鑒定 M3
4.8 抗生素 143
4.8.1 抗生素的種類 143
4.8.2 抗生素的效價測定 144
主要參考文獻 147
第5章 細胞分析檢測技術 148
5.1 細胞的分離與培養(yǎng) 148
5.1.1 細胞培養(yǎng)技術的特點與應用 148
5.1.2 培養(yǎng)細胞生長的條件 149
5.1.3 原代培養(yǎng)細胞的取材與分離 150
5.2 細胞形態(tài)與活性的常規(guī)檢測法 151
5.2.1 普通顯微染色觀察法 151
5.2.2 MTT法 153
5.3 數字顯微及激光共聚焦顯微分析法 155
5.3.1 數字顯微分析法 155
5.3.2 激光掃描共聚焦顯微觀察分析法 155
5.4 流式細胞術檢測技術 158
5.4.1 流式細胞術的發(fā)展簡史 158
5.4.2 流式細胞術的基本結構和工作原理 159
5.4.3 流式細胞術的應用 165
主要參考文獻 168
第6章 功效與代謝檢測技術 169
6.1 保健食品功效檢測與評價 169
6.1.1 保健食品概述 169
6.1.2 保健食品功能檢測 171
6.2 藥理檢測技術 183
6.2.1 藥效學檢測技術 183
6.2.2 藥物代謝動力學檢測技術 191
主要參考文獻 198
第7章 生物安全評價方法與技術 199
7.1 生物安全性評價基本方法 199
7.1.1 急性毒性試驗 199
7.1.2 蓄積毒性試驗 199
7.1.3 亞急性毒性試驗 200
7.1.4 慢性毒性試驗 201
7.1.5 致癌試驗 203
7.1.6 致突變試驗 204
7.1.7 代謝試驗 205
7.2 各主要制品生物安全性評價 205
7.2.1 食品安全性評價 205
7.2.2 藥物毒理及安全性評價 207
7.2.3 化妝品毒理及安全性評價 212
7.2.4 轉基因產品的安全性評價 222
7.3 質量安全認證 223
7.3.1 HACCP認證 223
7.3.2 GMP認證 224
7.3.3 QS認證 226
7.3.4 其他與生物技術產品相關的認證 228
主要參考文獻 228
第8章 生物傳感器及生物芯片技術 229
8.1 生物傳感器 229
8.1.1 生物傳感器的結構和原理 230
8.1.2 生物傳感器的定義與分類 230
8.1.3 幾種主要的生物傳感器 230
8.2 生物芯片 237
8.2.1 生物芯片的制造 238
8.2.2 生物芯片的使用和閱讀 241
8.2.3 各種生物芯片 244
8.2.4 生物芯片的應用 247
主要參考文獻 249