目錄
前言
第1章 化學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本知識(shí) 1
1.1 實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及須知 1
1.2 實(shí)驗(yàn)室安全及防護(hù)知識(shí) 1
1.2.1 防生物源性危害的基本措施 2
1.2.2 放射性和紫外線輻射的危害和防護(hù) 2
1.2.3 特殊化學(xué)生物學(xué)試劑的安全使用與儲(chǔ)存 2
1.2.4 化學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室廢棄物的處理 3
第2章 化學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作 6
2.1 常用儀器的洗滌與清潔 6
2.1.1 玻璃器皿的清洗 6
2.1.2 其他材質(zhì)器皿的清洗 6
2.1.3 鉻酸洗液的配制方法和使用注意事項(xiàng) 7
2.1.4 其他常用的洗液 7
2.2 常用消毒滅菌方法 7
2.2.1 物理消毒滅菌方法 7
2.2.2 化學(xué)消毒滅菌方法 8
2.3 離心技術(shù) 9
2.3.1 離心技術(shù)的原理 9
2.3.2 離心機(jī)的類型和轉(zhuǎn)頭的分類 11
2.3.3 常用離心方法 12
2.4 常用層析技術(shù) 13
2.4.1 凝膠層析 13
2.4.2 離子交換層析 14
2.4.3 親種層析 15
2.4.4 疏水層析 15
2.5 電泳技術(shù) 16
2.5.1 基本原理 16
2.5.2 瓊脂糖凝膠電泳 16
2.5.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳 16
2.5.4 等電聚焦電泳 17
2.5.5 二維電泳 18
2.5.6 毛細(xì)管電泳 18
2.5.7 凝膠成像技術(shù) 19
2.6 PCR技術(shù) 19
2.6.1 PCR技術(shù)簡(jiǎn)介 19
2.6.2 PCR技術(shù)的基本原理和過程 19
2.6.3 PCR反應(yīng)的五個(gè)元素 21
2.7 DNA測(cè)序技術(shù) 22
2.8 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 23
2.8.1 體外培養(yǎng)細(xì)胞的分類 23
2.8.2 培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖過程 24
2.8.3 原代培養(yǎng) 25
2.8.4 傳代培養(yǎng) 25
2.8.5 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇 26
2.9 化學(xué)生物學(xué)樣品制備、純化、濃縮和干燥 26
2.9.1 材料的選取和前處理 26
2.9.2 細(xì)胞的破碎 27
2.9.3 蛋白質(zhì)的提取和純化 27
2.9.4 核酸的提取和純化 28
2.9.5 樣品的濃縮和干燥 29
第3章 生化分離分析實(shí)驗(yàn)技術(shù) 31
實(shí)驗(yàn)1 疏水作用色譜分離純化α-淀粉酶 31
實(shí)驗(yàn)2 親和層析樹脂的制備及溶菌酶的提取純化 36
實(shí)驗(yàn)3 香菇多糖的提取、純化及總糖含量測(cè)定 40
實(shí)驗(yàn)4 青霉素�；�酶米氏常數(shù)和反應(yīng)活性的測(cè)定 44
實(shí)驗(yàn)5 靜電自組裝構(gòu)筑HRP多層膜電極檢測(cè)酚類物質(zhì)研究 47
實(shí)驗(yàn)6 表面等離子光譜生物傳感器研究抗原與抗體的相互作用 50
實(shí)驗(yàn)7 FRET法及熒光猝滅法測(cè)定蛋白酶的活性 54
第4章 生物材料制備實(shí)驗(yàn)技術(shù) 60
實(shí)驗(yàn)8 生物礦物和生物礦化——碳酸鈣多形的控制與制備 60
實(shí)驗(yàn)9 無定形碳酸鈣的制備和轉(zhuǎn)化 62
實(shí)驗(yàn)10 硫酸鏈霉素肺靶向明膠微球的制備及含量測(cè)定 64
實(shí)驗(yàn)11 聚乙烯亞胺-DNA復(fù)合物粒徑的測(cè)定 67
實(shí)驗(yàn)12 聚乙烯亞胺-阿霉素共聚物的合成 70
實(shí)驗(yàn)13 復(fù)凝聚法制備阿霉素微囊及細(xì)胞毒性評(píng)價(jià) 72
實(shí)驗(yàn)14 鹽酸左氧氟沙星不同晶形的制備及其表征 76
第5章 化學(xué)中基因工程實(shí)驗(yàn)技術(shù) 80
實(shí)驗(yàn)15 質(zhì)粒DNA的提取與純化 80
實(shí)驗(yàn)16 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備與質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化 84
實(shí)驗(yàn)17 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段 87
實(shí)驗(yàn)18 PCR基因擴(kuò)增獲取毛囊DNA及其分離 90
實(shí)驗(yàn)19 植物組織中基因組DNA的提取與擴(kuò)增 91
實(shí)驗(yàn)20 PCR-RFLP法檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性 95
實(shí)驗(yàn)21 基于連接反應(yīng)的滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性 100
實(shí)驗(yàn)22 枯草桿菌脂肪酶A的基因克隆 104
第6章 化學(xué)中蛋白質(zhì)工程實(shí)驗(yàn)技術(shù) 112
實(shí)驗(yàn)23 �；�酶催化4-硝基咪唑的Markovnikov加成反應(yīng) 112
實(shí)驗(yàn)24 2-脫氧尿苷衍生物的酶促合成的選擇性調(diào)控 114
實(shí)驗(yàn)25 酶催化Michael加成反應(yīng) 117
實(shí)驗(yàn)26 Novozym 435催化的1-位芳基取代的末端炔丙醇動(dòng)力學(xué)拆分反應(yīng) 120
實(shí)驗(yàn)27 金屬卟啉模擬的生物氧化過程 122
實(shí)驗(yàn)28 泛素蛋白的操控式分子動(dòng)力學(xué)模擬 125
實(shí)驗(yàn)29 纖連蛋白在羥磷灰石上吸附一脫附過程的分子模擬 136
第7章 化學(xué)中細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)技術(shù) 144
實(shí)驗(yàn)30 動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng) 144
實(shí)驗(yàn)31 MTT法測(cè)定聚乙烯亞胺的細(xì)胞毒性 148
實(shí)驗(yàn)32 抗腫瘤藥物5-氟尿嘧啶對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制及細(xì)胞形態(tài)觀察 150
實(shí)驗(yàn)33 ATP生物熒光藥敏檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)5一氟尿嘧啶對(duì)卵巢癌細(xì)胞的藥敏實(shí)驗(yàn) 153
實(shí)驗(yàn)34 杭腫瘤藥物5-氟尿嘧啶對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移的影響 156
實(shí)驗(yàn)35 聚乙烯亞胺-DNA復(fù)合物的制備和體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn) 158
實(shí)驗(yàn)36 聚乙烯亞胺攜帶基因在細(xì)胞中的熒光染色實(shí)驗(yàn) 160
實(shí)驗(yàn)37 聚乙烯亞胺作為基因載體材料攜帶TRAII.基因?qū)��?xì)胞凋亡的影響 163
實(shí)驗(yàn)38 聚乙烯亞胺邛可霉素聚合物的細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn) 166
實(shí)驗(yàn)39 硫酸氫氯吡格雷對(duì)人胃黏膜上皮細(xì)胞株GES-1增殖影響 168
實(shí)驗(yàn)40 喹諾酮類藥物鹽酸左氧氟沙星的抑菌實(shí)驗(yàn) 170
實(shí)驗(yàn)41 聚乙烯亞胺邛可霉素皮下注射體內(nèi)滯留實(shí)驗(yàn) 172
第8章 附錄 175
8.1 常用儀器的使用說明 175
8.1.1 移液槍 175
8.1.2 氣相色譜儀 177
8.1.3 液相色譜儀 178
8.1.4 紫外可見分光光度計(jì) 179
8.1.5 紅外光譜儀 181
8.1.6 熒光分光光度計(jì) 182
8.1.7 PCR儀 183
8.1.8 表面等離子共振生物傳感實(shí)驗(yàn)儀 184
8.1.9 蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng) 187
8.1.10 CHI電化學(xué)分析儀 188
8.1.11 高速冷凍離心機(jī) 189
8.1.12 C02培養(yǎng)箱 191
8.1.13 倒置相差顯微鏡 192
8.1.14 酶標(biāo)儀 193
8.1.15 活體熒光成像系統(tǒng) 194
8.2 常用緩沖溶液的配制 195
8.3 常用特殊化學(xué)生物學(xué)試劑的配制 197
8.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)液的配制 197
8.3.2 MTT溶液的配制方法 198
8.3.3 HE染色液的配制 198
8.4 Linux操作系統(tǒng)的基本操作 199
8.5 生物信息數(shù)據(jù)庫(kù) 200