本書主要對化學(xué)生物學(xué)的一些重要實驗技術(shù)進行講解。全書包括6個實驗,分別介紹化學(xué)生物學(xué)學(xué)科中6種重要的實驗技術(shù)及其涉及的背景知識,包括蛋白質(zhì)的合成與小分子調(diào)控、利用生物分子誘導(dǎo)化學(xué)反應(yīng)、藥物靶點的發(fā)現(xiàn)與鑒別以及活體標(biāo)記和熒光成像技術(shù)等。
前言
實驗1 生物大分子的固相合成與質(zhì)譜分析
1.1 背景知識
1.1.1 生物大分子及其獲取方法
1.1.2 多肽固相合成流程
1.1.3 生物大分子的質(zhì)譜分析
1.2 實驗設(shè)計
1.3 實驗操作
1.3.1 儀器試劑
1.3.2 實驗步驟
1.4 分析討論
1.4.1 氨基酸偶聯(lián)時間對產(chǎn)率的影響
1.4.2 切割時間的影響
1.4.3 多肽粗產(chǎn)品的分離
1.4.4 其他方法
1.5 總結(jié)與思考題
參考文獻(xiàn)
實驗2 蛋白質(zhì)連接反應(yīng)與蛋白質(zhì)半合成
2.1 知識背景
2.1.1 蛋白質(zhì)生物表達(dá)的基本原理
2.1.2 蛋白質(zhì)半合成基本原理
2.1.3 Intein基本原理
2.2 實驗設(shè)計
2.3 實驗操作
2.3.1 儀器試劑
2.3.2 實驗步驟
2.4 分析討論
2.4.1 Intein融合蛋白的表達(dá)效率
2.4.2 脫鹽效率對Ub-AMC活性的影響
2.5 總結(jié)與思考題
參考文獻(xiàn)
實驗3 非天然氨基酸的定點嵌入與標(biāo)記
3.1 背景知識
3.1.1 合成生物學(xué)
3.1.2 天然蛋白質(zhì)中引入非天然氨基酸的基本原理
3.1.3 含有非天然氨基酸蛋白質(zhì)的應(yīng)用
3.2 實驗設(shè)計
3.3 實驗操作
3.3.1 儀器試劑
3.3.2 實驗步驟
3.4 分析討論
3.4.1 引入非天然氨基酸蛋白質(zhì)的表達(dá)效率
3.4.2 脫鹽對點擊化學(xué)反應(yīng)的影響
3.5 總結(jié)與思考題
參考文獻(xiàn)
實驗4 DNA模板控制的點擊化學(xué)反應(yīng)
4.1 背景知識
4.1.1 DNA
4.1.2 核酸編碼文庫
4.1.3 核酸模板控制的化學(xué)反應(yīng)
4.2 實驗設(shè)計
4.3 實驗操作
4.3.1 儀器試劑
4.3.2 實驗步驟
4.4 分析討論
4.5 總結(jié)與思考題
參考文獻(xiàn)
實驗5 蛋白質(zhì)聚集及小分子對其抑制作用
5.1 背景知識
5.1.1 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)生物學(xué)
5.1.2 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與重要人類疾病的關(guān)系
5.1.3 Tau蛋白介導(dǎo)阿爾茲海默癥的機理及相關(guān)藥物
5.2 實驗設(shè)計
5.3 實驗操作
5.3.1 儀器試劑
5.3.2 實驗步驟
5.4 分析討論
5.5 總結(jié)與思考題
參考文獻(xiàn)
實驗6 小分子探針在藥物靶點鑒定中的應(yīng)用
6.1 背景知識
6.1.1 基于活性的蛋白質(zhì)譜學(xué)方法
6.1.2 小分子調(diào)控蛋白活性
6.2 實驗設(shè)計
6.3 實驗操作
6.3.1 儀器試劑
6.3.2 實驗步驟
6.4 分析討論
6.4.1 實驗設(shè)計及教學(xué)安排
6.4.2 熒光基團性質(zhì)對實驗結(jié)果的影響
6.5 總結(jié)與思考題
參考文獻(xiàn)