耿寶榮主編的《動物學(xué)實驗》內(nèi)容提要:本書是編者根據(jù)多年的教學(xué)經(jīng)驗,并在參考國內(nèi)外同類教材的基礎(chǔ)上精心編寫而成。全書按照動物進(jìn)化系統(tǒng)從低等到高等的 順序編排29個基礎(chǔ)性實驗和4個綜合性實驗,實驗內(nèi)容涉及各門類代表動物的形態(tài)觀察與解剖、常見種類描述等。每個實驗前均簡述該實驗的意義、實驗操作的關(guān) 鍵步驟及相關(guān)注意事項。 《動物學(xué)實驗》可作為高等院校動物學(xué)實驗教學(xué)用書,也可供農(nóng)業(yè)、林業(yè)、水產(chǎn)及醫(yī)學(xué)類院校相關(guān)專業(yè)學(xué)生參考。
更多科學(xué)出版社服務(wù),請掃碼獲取。
耿寶榮主編的《動物學(xué)實驗》內(nèi)容介紹:本書以“重視基本知識和基本技能、注重學(xué)生的能力培養(yǎng)”為主要特色,保持了動物學(xué)實驗中的經(jīng)典內(nèi)容,配以大量模式示 意圖,便于學(xué)生學(xué)習(xí)基本實驗方法與操作技術(shù),印證相關(guān)理論學(xué)習(xí)的內(nèi)容。書中安排的綜合實驗可以培養(yǎng)學(xué)生綜合分析問題和解決問題的能力。用于解剖實驗的動 物,盡量采用人工養(yǎng)殖種類:在動物分類上,突出各分類階元的代表性及南方物種的描述。文后附有相關(guān)的主要參考文獻(xiàn)。
第1部分 基礎(chǔ)性實驗
實驗1 動物的細(xì)胞和組織
【目的與要求】
1. 了解動物細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu);
2. 掌握動物組織臨時裝片和涂片的一般制作方法;
3. 掌握動物
4. 類基本組織的結(jié)構(gòu)特點,理解組織結(jié)構(gòu)與機(jī)能的關(guān)系。
【實驗材料】
活蛙,蝗蟲浸制標(biāo)本,動物各組織的玻片標(biāo)本。
【用具與藥品】顯微鏡、載玻片、蓋玻片、解剖器、吸管、吸水紙、牙簽、染色缸、玻片架。
0.1%的亞甲藍(lán)、0.65%及0.9%的生理鹽水溶液、甲醇、吉姆薩染液、蒸餾水。
【操作與觀察】
1. 制片與觀察
(1)人口腔上皮細(xì)胞的制備與觀察滴一滴0.9%生理鹽水于載玻片中央,用牙簽在自己的口腔頰部輕輕刮幾下(注意不要用力過猛,以免損傷頰部),將刮下的白色黏性物質(zhì)薄而均勻地涂在載玻片上,然后加蓋玻片,在低倍鏡下觀察?谇簧掀ぜ(xì)胞常數(shù)個連在一起,由于口腔上皮細(xì)胞薄而透明,因此光線需要暗些。找到口腔上皮細(xì)胞后,將其移至視野中心,再轉(zhuǎn)高倍鏡觀察?谇簧掀ぜ(xì)胞呈扁平多邊形。試辨認(rèn)細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜。若觀察不清楚時,可在蓋玻片一側(cè)加一滴0.1%的亞甲藍(lán),另一側(cè)放一小塊吸水紙吸引,如此可使染液流入蓋玻片下面,將細(xì)胞染成淺藍(lán)色,核染色較深。注意染液不可過多,以免妨礙觀察。
(2)骨骼肌的制片與觀察用尖頭鑷子取蝗蟲浸制標(biāo)本胸部肌肉少許,置于載玻片上的水滴中。用解剖針仔細(xì)分離肌纖維(越細(xì)越好)。用0.1%亞甲藍(lán)染色,蓋上蓋玻片后置于顯微鏡下觀察。
(3)血液涂片的制備與觀察左手從蛙背面握蛙,右手持注射器從蛙胸部進(jìn)針刺入蛙心臟采血,滴一滴在潔凈載玻片右端,注意血滴不宜過大。另取邊緣光滑的一塊載玻片作推片,斜置于第一塊載玻片血滴的左緣,角度成40°左右。將推片稍向右移,接觸血滴,使血液充滿兩玻片之間的夾角。再將推片向左方勻速推進(jìn),使玻片上留下薄而均勻的血膜。搖動涂有血膜的玻片,使之盡快干燥,避免細(xì)胞皺縮。晾干后的血涂片放入盛有甲醇的染色缸內(nèi),固定3~5min。將固定后的血涂片平放在玻片架上,滴加數(shù)滴吉姆薩染液,以覆蓋血膜為宜,染色15~30min。然后在染色玻片的一端用自來水細(xì)流緩緩沖去染液,斜立血涂片于玻片架上,晾干后置顯微鏡下觀察。
在低倍鏡下選擇分布均勻的血細(xì)胞,換高倍鏡觀察。蛙紅細(xì)胞呈橢圓形,中央有一橢圓形細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色,此外,還可見到白細(xì)胞和凝血細(xì)胞。
2. 觀察各組織制片
(1)上皮組織
1)單層立方上皮(甲狀腺切片):低倍鏡觀察,可看到許多大小不等的、圓形或橢圓形的紅色甲狀腺濾泡。高倍鏡觀察,濾泡壁由一層立方上皮細(xì)胞構(gòu)成,核圓形、藍(lán)紫色,位于細(xì)胞中央,細(xì)胞質(zhì)粉紅色(圖1-1)。
2)單層柱狀上皮(小腸橫切片):低倍鏡觀察,可見黏膜面形成許多指狀突起,突向管腔,突起表面覆有一層柱狀上皮。高倍鏡觀察,可見上皮細(xì)胞為柱狀,核長橢圓形、藍(lán)紫色,靠近細(xì)胞的基底部。把光圈縮小,減少光量,可見細(xì)胞的游離面有一層較亮的粉紅色膜狀結(jié)構(gòu),稱為紋狀緣。在柱狀細(xì)胞之間散在有杯狀細(xì)胞,此細(xì)胞上端膨大、下端細(xì)小,核呈三角形或半圓形,位于細(xì)胞基底部。在杯狀細(xì)胞上端的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)積有大量不著色的黏液,在切片上呈卵形空泡狀結(jié)構(gòu),細(xì)胞游離面無紋狀緣(圖1-2)。
3)復(fù)層扁平上皮(食道橫切片):低倍鏡觀察,此上皮由許多層細(xì)胞組成,上皮的基底面呈波浪形。高倍鏡觀察,可見與基膜相連的是一層排列整齊的矮柱狀細(xì)胞,細(xì)胞核橢圓形。中層為幾層多角形細(xì)胞,排列不整齊,核扁平。接近上皮表面的細(xì)胞變?yōu)楸馄綘,核著色淡,甚至模糊不清(圖1-3)。
(2)肌肉組織
1)骨骼。旱捅剁R觀察,在縱切面上可見骨骼肌為長條形肌纖維,在肌纖維間有染色較淡的結(jié)締組織。高倍鏡觀察,單個骨骼肌纖維呈長圓柱形,其表面有肌膜,肌膜內(nèi)側(cè)有許多染成藍(lán)紫色的橢圓形細(xì)胞核?s小光圈,使視野不致過亮,可見到每條肌纖維內(nèi)有很多縱行的細(xì)絲狀肌原纖維,肌原纖維上有明暗相間的橫紋,即明帶和暗帶。在橫切面上,可見肌纖維呈多邊形或不規(guī)則圓形,外有肌膜,細(xì)胞核卵圓形緊貼肌膜內(nèi)側(cè)。肌原纖維呈小紅點狀,在肌漿內(nèi)排列不均勻,所以在橫切面上呈現(xiàn)小區(qū)(圖1-4)。
2)心。合鹊捅剁R后高倍鏡觀察,在縱切面上,心肌纖維彼此以分支相連,核卵圓形,位于肌纖維中央。縮小虹彩光圈,使光線暗些,可看到心肌纖維的橫紋,但不及骨骼肌的明顯,在心肌纖維及其分支上,可見到染色較深的梯形橫線,即閏盤。在橫切面上,心肌纖維為不規(guī)則橫線,由于切片的關(guān)系,有的有核,有的無核(圖1-5)。
3)平滑。合鹊捅剁R后高倍鏡觀察蛙的平滑肌分離裝片,可見分離的平滑肌纖維呈長梭形,核長橢圓形,位于細(xì)胞中部,在常規(guī)染色標(biāo)本上肌原纖維分辨不清楚(圖1-6)。
(3)神經(jīng)組織(脊髓橫切片)肉眼觀察,脊髓橫切片中央為蝴蝶狀的灰質(zhì),其中心有一孔為中央管,灰質(zhì)較狹的一端為背角,較寬的為腹角;包圍在灰質(zhì)周圍染色較淡的部分是白質(zhì)。
低倍鏡觀察,將脊髓灰質(zhì)腹角移至視野中央,觀察神經(jīng)元。在腹角內(nèi)有許多較大的多突起細(xì)胞即脊髓腹角運動神經(jīng)元,為多極神經(jīng)元。神經(jīng)元胞體上的突起包括樹突和軸突,但兩者不易區(qū)分,一般可根據(jù)軸突基部的軸丘處染色較淺(無尼氏體)來識別軸突。選擇一個胞體較大、突起較多、核較清晰的神經(jīng)元移至視野中央。高倍鏡觀察,神經(jīng)元的核較大,呈囊泡狀,居細(xì)胞中央,核內(nèi)有染色較深的核仁。
(4)結(jié)締組織
1)透明軟骨(貓的氣管橫切片):肉眼觀察,氣管壁內(nèi)染色略深的“C”形結(jié)構(gòu)即透明軟骨,將該部位置于顯微鏡視野中央。
低倍鏡觀察,透明軟骨表面包有一層致密結(jié)締組織的軟骨膜。近軟骨膜的軟骨細(xì)胞較小而密,梭形,單個排列,其長軸與軟骨膜平行。軟骨中心部分的軟骨細(xì)胞較大,呈橢圓形或圓形,常2~4個成群分布。由軟骨表面至軟骨中心有質(zhì)地均勻的基質(zhì)。高倍鏡觀察,有軟骨細(xì)胞存在的地方稱為陷窩。在制片過程中有的軟骨細(xì)胞脫落,則軟骨陷窩呈現(xiàn)為白色空腔;有的軟骨細(xì)胞有所收縮,其周圍的白色間隙也是陷窩的一部分,陷窩周圍的基質(zhì)著色略深,稱為軟骨囊(圖1-7)。
2)骨組織(長骨橫切面磨片):低倍鏡觀察,可見許多骨板呈多層同心圓排列的結(jié)構(gòu),即骨單位(哈佛氏系統(tǒng))。每個骨單位的中央有一個黑色、較大的圓形管道的橫斷面即為中央管(哈佛氏管),在此管周圍有許多呈同心圓排列的骨單位骨板(哈佛氏骨板)。各哈佛氏系統(tǒng)之間還存在著一些不呈同心圓排列的骨板,即間骨板。
高倍鏡觀察,在骨板內(nèi)或骨板間有許多扁卵圓形呈黑角的小腔隙,即骨陷窩,其內(nèi)的骨細(xì)胞已不存在,骨陷窩向四周發(fā)出許多細(xì)小放射狀的黑色分支即骨小管,相鄰骨陷窩之間的骨小管彼此相連通,靠近哈佛氏管的骨小管則與哈佛氏管相連通(圖1-8)。
3)疏松結(jié)締組織:低倍鏡觀察,可見交織成網(wǎng)的纖維及分布在纖維之間的結(jié)締組織細(xì)胞。高倍鏡下觀察,膠原纖維為粉紅色粗細(xì)不等的細(xì)帶狀,它們相互交叉排列,數(shù)量較多,有時膠原纖維呈波浪狀。彈性纖維為深紫褐色,其斷端常呈現(xiàn)卷曲狀,纖維粗細(xì)不等,比膠原纖維細(xì),單條分布而不成束,有分支并交織成網(wǎng)。成纖維細(xì)胞數(shù)量最多,胞體大,呈多突扁平形,染色淺,輪廓不明顯,核多為橢圓形,藍(lán)紫色,可見1或2個核仁。巨噬細(xì)胞形狀不一,與成纖維細(xì)胞的區(qū)別在于細(xì)胞質(zhì)中含有吞噬的臺盼藍(lán)顆粒,細(xì)胞輪廓較明顯,核較小,圓形或卵圓形。肥大細(xì)胞常成群分布在毛細(xì)血管附近,胞體較大,圓形或卵圓形,細(xì)胞質(zhì)中充滿粗大的藍(lán)紫色顆粒,核小,圓形或橢圓形,位于細(xì)胞中央。漿細(xì)胞數(shù)量少,很難在鋪片上見到,呈橢圓形,核染色深,居細(xì)胞一側(cè),核內(nèi)含有豐富的染色質(zhì),聚集在核周圍,向核中心輻射狀排列,近核處有一著色淺的區(qū)域(圖1-9)。