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叢書(shū)名:微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程系列普通高等教育“十二五”規(guī)劃教材
- 作者:李穎,李明春主編
- 出版時(shí)間:2014/6/30
- ISBN:9787030411129
- 出 版 社:科學(xué)出版社
- 中圖法分類(lèi):Q949
- 頁(yè)碼:184
- 紙張:膠版紙
- 版次:1
- 開(kāi)本:16開(kāi)
本實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)涵蓋了真菌形態(tài)、生理及其遺傳機(jī)制的內(nèi)容。在學(xué)習(xí)到真菌形態(tài)觀察及其制片技術(shù)的同時(shí),理解和把握現(xiàn)代真菌分類(lèi)學(xué)的情況;根據(jù)真菌的生理特點(diǎn),掌握其在自然界抵御環(huán)境變化的內(nèi)在機(jī)制,如異核體的產(chǎn)生及其機(jī)制;為充分發(fā)揮真菌的作用,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容還包括了真菌相關(guān)基因的克隆及其檢測(cè)、真菌分泌表達(dá)外源基因的策略等實(shí)驗(yàn),這些實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)原理與原核微生物相比,存在著本質(zhì)的區(qū)別。本實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)既注重基礎(chǔ)理論和方法,有注重了現(xiàn)代真菌研究的發(fā)展方向及其技術(shù)理念,不僅可供本科生和研究生課程所用,而且可提供作為大、專院校和科研院所研究人員參考。
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目錄
實(shí)驗(yàn)一 壺菌綱、卵菌綱代表菌形態(tài)特征觀察 1
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1
二、實(shí)驗(yàn)原理 1
三、實(shí)驗(yàn)材料 1
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟 2
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 11
六、思考題 11
七、參考文獻(xiàn) 11
附:半永久裝片的制作方法 11
實(shí)驗(yàn)二 接合菌門(mén)真菌的鑒定 12
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?12
二、實(shí)驗(yàn)原理 12
三、實(shí)驗(yàn)材料 12
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟 12
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 17
六、思考題 17
七、參考文獻(xiàn) 18
附:培養(yǎng)水玉霉圖示 18
實(shí)驗(yàn)三 子囊菌門(mén)代表菌形態(tài)特征觀察 19
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?19
二、實(shí)驗(yàn)原理 19
三、實(shí)驗(yàn)材料 19
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟 20
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 28
六、思考題 28
七、參考文獻(xiàn) 28
附:真菌的石蠟制片技術(shù)流程 29
實(shí)驗(yàn)四 擔(dān)子菌門(mén)代表菌的形態(tài)特征觀察 31
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?31
二、實(shí)驗(yàn)原理 31
三、實(shí)驗(yàn)材料 31
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟 31
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 38
六、思考題 38
七、參考文獻(xiàn) 39
附:冷凍切片實(shí)驗(yàn)流程及注意事項(xiàng) 39
實(shí)驗(yàn)五 半知菌類(lèi)代表菌形態(tài)特征觀察 42
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?42
二、實(shí)驗(yàn)原理 42
三、實(shí)驗(yàn)材料 42
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟 43
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 48
六、思考題 48
七、參考文獻(xiàn) 49
附:掃描電子顯微鏡樣品制作及觀察絲狀真菌 49
實(shí)驗(yàn)六 黏菌基本形態(tài)特征的觀察 51
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?51
二、實(shí)驗(yàn)原理 51
三、實(shí)驗(yàn)材料 51
四、實(shí)驗(yàn)步驟 52
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 53
六、思考題 54
也參考文獻(xiàn) 54
附:幾種黏菌屬種描述,請(qǐng)?jiān)隗w視顯微鏡下觀察所提供的標(biāo)本 54
黏菌子實(shí)體圖例 55
實(shí)驗(yàn)七 絲狀真菌細(xì)胞核的DAPI染色及觀察 57
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?57
二、實(shí)驗(yàn)原理 57
三、實(shí)驗(yàn)材料 57
四、實(shí)驗(yàn)步驟 58
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 58
六、思考題 59
七、參考文獻(xiàn) 59
附:熒光顯微鏡簡(jiǎn)介及使用步驟 59
實(shí)驗(yàn)八 釀酒酵母原生質(zhì)體制備與再生 62
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?62
二、實(shí)驗(yàn)原理 62
三、實(shí)驗(yàn)材料 62
四、實(shí)驗(yàn)步驟 63
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 64
六、思考題 64
附:幾種細(xì)菌過(guò)濾器及其使用 65
實(shí)驗(yàn)九 稻巨座殼菌自噬體的顯微觀察 66
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?66
二、實(shí)驗(yàn)原理 66
三、實(shí)驗(yàn)材料 68
四、實(shí)驗(yàn)步驟 70
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 71
六、思考題 71
七、參考文獻(xiàn) 71
實(shí)驗(yàn)十 氧化脅迫誘導(dǎo)白假絲酵母細(xì)胞凋亡的熒光檢測(cè) 72
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?72
二、實(shí)驗(yàn)原理 72
三、實(shí)驗(yàn)材料 74
四、實(shí)驗(yàn)步驟 75
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 76
六、思考題 76
七、參考文獻(xiàn) 76
實(shí)驗(yàn)十一 絲狀真菌疏水蛋白的分離提取和檢測(cè) 77
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?77
二、實(shí)驗(yàn)原理 77
三、實(shí)驗(yàn)材料 80
四、實(shí)驗(yàn)步驟 80
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 83
六、思考題 83
七、參考文獻(xiàn) 83
實(shí)驗(yàn)十二 絲狀真菌DNA快速提取及其18S rDNA序列測(cè)定 84
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?84
二、實(shí)驗(yàn)原理 84
三、實(shí)驗(yàn)材料 85
四、實(shí)驗(yàn)步驟 86
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 88
六、思考題 88
七、參考文獻(xiàn) 88
實(shí)驗(yàn)十三 絲狀真菌總RNA及mRNA的提取與檢測(cè) 89
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?89
二、實(shí)驗(yàn)原理 89
三、實(shí)驗(yàn)材料 92
四、實(shí)驗(yàn)步驟 94
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 96
六、思考題 96
七、參考文獻(xiàn) 96
實(shí)驗(yàn)十四 細(xì)菌源耐熱木聚糖酶基因在黑曲霉中的表達(dá) 98
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?98
二、實(shí)驗(yàn)原理 98
三、實(shí)驗(yàn)材料 101
四、實(shí)驗(yàn)步驟 105
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 107
六、思考題 107
七、參考文獻(xiàn) 107
實(shí)驗(yàn)十五 脂肪酶基因在畢赤酵母中的表達(dá)與目的蛋白檢測(cè) 108
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?108
二、實(shí)驗(yàn)原理 108
三、實(shí)驗(yàn)材料 110
四、實(shí)驗(yàn)步驟 110
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 113
六、思考題 113
七、參考文獻(xiàn) 113
實(shí)驗(yàn)十六 真核細(xì)胞表達(dá)異源蛋白的糖基化修飾及檢測(cè) 114
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?114
二、實(shí)驗(yàn)原理 114
三、實(shí)驗(yàn)材料及試劑 116
四、實(shí)驗(yàn)步驟 116
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 118
六、思、考題 118
七、參考文獻(xiàn) 118
實(shí)驗(yàn)十七 多拷貝異源基因重組表達(dá)體系的構(gòu)建及其qPCR檢測(cè).119
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?119
二、實(shí)驗(yàn)原理 119
三、實(shí)驗(yàn)材料 120
四、實(shí)驗(yàn)步驟 121
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 125
六、思考題 125
七、參考文獻(xiàn) 126
附:實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀圖示及其基本技術(shù)原理詳解 126
實(shí)驗(yàn)十八 采用重疊PCR技術(shù)敲除粟酒裂殖酵母Clr4基因 128
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?128
二、實(shí)驗(yàn)原理 128
三、實(shí)驗(yàn)材料 130
四、實(shí)驗(yàn)步驟 132
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 135
六、思考題 135
七、參考文獻(xiàn) 135
實(shí)驗(yàn)十九 利用細(xì)菌CRISPR/Cas系統(tǒng)敲除釀酒酵母目的基因 136
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?136
二、實(shí)驗(yàn)原理 136
三、實(shí)驗(yàn)材料 138
四、實(shí)驗(yàn)步驟 139
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 140
六、思考題 141
參考文獻(xiàn) 141
實(shí)驗(yàn)二十 粗糙脈孢菌雙基因缺失突變體的構(gòu)建及雙基因的遺傳互作分析 142
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?142
二、實(shí)驗(yàn)原理 142
三、實(shí)驗(yàn)材料 144
四、實(shí)驗(yàn)步驟 147
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(作業(yè)) 148
六、思考題 149
七、參考文獻(xiàn) 149
附錄1 常用培養(yǎng)基配方及染色液 150
附錄2 安斯沃思(Ainsworth,1973)的分類(lèi)系統(tǒng) 159
附錄3 真菌詞典第八版(1995年)的分類(lèi)體系 160
附錄4 真菌詞典第九版(2001年)的分類(lèi)體系 161
附錄5 真菌詞典第十版(2008年)的分類(lèi)體系 163
附錄6 互動(dòng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備使用原則及方法(學(xué)生端的使用) 165
附錄7 真菌常用網(wǎng)站 167
附錄8 常用真菌學(xué)名列表 169
附錄9 真菌圖例 179
附錄10 黏菌子實(shí)體圖例 185
附錄11 實(shí)驗(yàn)七和實(shí)驗(yàn)十彩圖 186