《食品微生物學(xué)》在食品微生物學(xué)基本知識(shí)和進(jìn)一步深化的基礎(chǔ)上,結(jié)合近年來食品微生物學(xué)的發(fā)展動(dòng)態(tài),融入并強(qiáng)化了一些新的知識(shí)點(diǎn),其中包括微生物與食源性疾病、微生物與食品安全、微生物生長模型與安全預(yù)警技術(shù)等內(nèi)容!妒称肺⑸飳W(xué)》著眼于國內(nèi)外食品微生物學(xué)的研究與發(fā)展現(xiàn)狀,不但對(duì)食品生產(chǎn)中的微生物予以較多關(guān)注,而且對(duì)涉及食品安全方面微生物問題的闡述較目前同類教材更為系統(tǒng)全面。
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《食品微生物學(xué)》可供高等院校食品科學(xué)與工程、食品質(zhì)量與安全、釀酒工程、包裝工程、生物工程、生物技術(shù)、營養(yǎng)與食品衛(wèi)生及相關(guān)專業(yè)的廣大師生參考,對(duì)于相關(guān)專業(yè)的科技人員及相關(guān)生產(chǎn)領(lǐng)域的專業(yè)人員也具有參考價(jià)值。
第1章 緒 論
概述
當(dāng)你清晨起床后,呼吸著清新的空氣,一邊喝著可口的酸奶,一邊品嘗著美味的面包或饅頭,這時(shí)你正在享受著微生物給你帶來的恩惠;當(dāng)你因?yàn)槌粤瞬粷嵉氖澄锒稍诓〈采辖?jīng)受病痛的折磨時(shí),你正在承受著食源性有害微生物對(duì)你身體的侵害。微生物是一把十分鋒利的雙刃劍,在食品行業(yè),小到涉及每家每戶的日常飲食,大到營業(yè)額上萬億元的食品工業(yè),都離不開微生物的作用。同時(shí),有害微生物對(duì)食品的侵染是食品安全的巨大挑戰(zhàn),甚至有時(shí)威脅到人類的生存。
食品微生物學(xué)主要研究與食品生產(chǎn)、食品安全有關(guān)的微生物的特性,研究如何更好地利用有益微生物為人類生產(chǎn)各種各樣的食品及改善食品質(zhì)量,防止有害微生物引起食品腐敗變質(zhì)、食物中毒,并不斷開發(fā)新的食品微生物資源。
食品微生物學(xué)是一個(gè)令人著迷與興奮的領(lǐng)域,研究它們既充滿挑戰(zhàn)又充滿樂趣。在學(xué)習(xí)中,食品微生物遠(yuǎn)非微小生物的認(rèn)識(shí),它需要更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)乃伎肌⒏有路f的研究方法、更加大膽的懷疑態(tài)度。學(xué)生需要不斷地強(qiáng)化學(xué)習(xí)技能和創(chuàng)新思維方式,以便能夠解決明天出現(xiàn)的新問題。
1.1 微生物及其特點(diǎn)
微生物是指一類肉眼看不見的,必須借助于顯微鏡,放大數(shù)十倍、數(shù)百倍甚至數(shù)千倍才能觀察到的,有一定的結(jié)構(gòu)和形態(tài)并能在適宜環(huán)境中生長繁殖的細(xì)小生物。微生物是一大群種類各異、獨(dú)立生活的生物體。這些微小的生物包括無細(xì)胞結(jié)構(gòu)不能獨(dú)立生活的病毒、亞病毒(類病毒、擬病毒、朊病毒),原核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的真細(xì)菌、古細(xì)菌和有真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的真菌(酵母、霉菌等),有的也把藻類、原生動(dòng)物包括在其中。在以上這些微生物群中,大多數(shù)是肉眼看不見的,如病毒等生物體,即使在普通光學(xué)顯微鏡下也不能看到,必須在電鏡下才能觀察到;有的微生物尤其是真菌、大型食用真菌,毫無疑問是可見的。近年來,德國科學(xué)家在納米比亞海岸的海底沉積物中發(fā)現(xiàn)的硫細(xì)菌(sulfur bacterium)被命名為Thiomargarita namibiensis,即納米比亞珍珠硫細(xì)菌,是一種可見的細(xì)菌(大小為0.1~0.3mm,有些可達(dá)0.75mm)。以上足以說明“微生物”是一個(gè)微觀世界里生物體的總稱,它們的數(shù)量眾多,達(dá)天文數(shù)字,種類繁雜,只真菌就可達(dá)7萬種。
微生物和動(dòng)植物一樣具有生物最基本的特征即新陳代謝,有生命周期,還有其自身的特點(diǎn)。
1.1.1 種類多、分布廣
據(jù)統(tǒng)計(jì),已發(fā)現(xiàn)的微生物種類達(dá)10萬種以上,廣泛分布于自然界中。按其結(jié)構(gòu)、組成等分為三大類。
1)非細(xì)胞型微生物:體積極微小,能通過濾菌器,只能在活細(xì)胞內(nèi)生長繁殖,病毒就屬于這一類。
2)原核細(xì)胞型微生物:僅有原始的核,無核膜和核仁,缺乏完整的細(xì)胞器,如細(xì)菌、衣原體、支原體、立克次氏體、螺旋體和放線菌。
3)真核細(xì)胞型微生物:細(xì)胞核的分化程度較高,有核膜、核仁和染色體,細(xì)胞內(nèi)有完整的細(xì)胞器,真菌和微細(xì)藻類即為真核細(xì)胞型微生物。
微生物在自然界的分布是極其廣泛的,上至幾萬米的高空,下至數(shù)千米的深海;高達(dá)90℃的溫泉,冷至?80℃的南極;鹽湖、沙漠、人體內(nèi)外、動(dòng)植物組織、化膿的傷口等都有微生物的足跡,真可謂無孔不入。凡是有高等生物存在的地方,就有微生物的存在,甚至沒有高等生物的地方,也有微生物的存在。微生物之所以分布廣,與其本身小而輕是密切相關(guān)的。衡量微生物個(gè)體的大小,通常以微米(μm)為單位,例如,大腸桿菌的大小為(0.4~0.7)μm×(1.0~4.0)μm。從質(zhì)量上來講,細(xì)菌的質(zhì)量一般只有1×10?10~1×10?9mg,也就是說,大約10億個(gè)細(xì)菌才有1mg重。病毒就更小了。
微生物雖然分布廣泛,但其分布密度是不一樣的,它隨著外界環(huán)境條件的不同而不同。一般來說,外界環(huán)境條件適宜,即有機(jī)物質(zhì)豐富的地方,微生物的種類和數(shù)量就多。一個(gè)感冒患者,打一個(gè)噴嚏就含有1500萬左右個(gè)病毒。土壤更是微生物的大本營,在1g肥沃的土壤里,含有幾十億個(gè)微生物。相反,如果在營養(yǎng)缺乏、條件惡劣的地方,微生物的種類和數(shù)量就大大減少了。
1.1.2 繁殖速度快
繁殖快是微生物最重要的特點(diǎn)之一。因?yàn)閱蝹(gè)細(xì)胞的生命周期是有限的,不會(huì)保持很長時(shí)間,所以微生物很快就會(huì)發(fā)展成為一個(gè)種群。
以細(xì)菌為例,通常20~30min即可分裂1次,繁殖1代,其數(shù)目比原來增加1倍。如果20min分裂1次,而且每個(gè)克隆子細(xì)胞都具有同樣的繁殖能力,那么1h后就是23個(gè),2h后就是26個(gè),24h后就是272個(gè),即由一個(gè)原始親本變成了272個(gè)細(xì)菌。
普通的大腸桿菌在牛乳組成的基質(zhì)中,如果給其提供最適的培養(yǎng)條件,那么菌體繁殖一代僅需12.5min。以此速度計(jì)算,在理想條件下,一個(gè)大腸桿菌細(xì)胞一晝夜就能繁殖115代,數(shù)量可增殖到4.15×1034個(gè),干菌體質(zhì)量可達(dá)約l0l6t(通常每克干的細(xì)菌菌體約4.5×1012個(gè))。按每109個(gè)細(xì)菌重1mg計(jì),272個(gè)細(xì)菌的質(zhì)量超過4722t。
當(dāng)然這種驚人的增殖速度在現(xiàn)實(shí)中是無法實(shí)現(xiàn)的。只在細(xì)菌的生長對(duì)數(shù)期才有如此的增殖速度。這種高增殖速度可為人類所利用。例如,以石油為原料,通過微生物發(fā)酵生產(chǎn)蛋白質(zhì),8~12h收獲1次。獲得同等數(shù)量的蛋白質(zhì),利用微生物合成的速度比利用植物合成要快500倍,比利用動(dòng)物合成要快2000倍。有人計(jì)算,如果每日能生產(chǎn)4500t酵母,其所含蛋白質(zhì)就相當(dāng)于10 000頭牛。也可利用酵母生產(chǎn)乙醇,例如,用1kg酵母菌可在24h內(nèi)發(fā)酵消耗幾千克糖,生成乙醇;也可利用乳酸菌生產(chǎn)乳酸,每個(gè)細(xì)胞生產(chǎn)的乳酸是其體重的103~104倍。
在遺傳學(xué)的研究上,選用微生物作為實(shí)驗(yàn)材料,可大大縮短研究周期。但微生物繁殖速度快這一特性給動(dòng)植物疫病的防治,食品的防腐、保鮮等方面帶來了巨大的挑戰(zhàn)。
由于微生物個(gè)體結(jié)構(gòu)簡單、繁殖快,因此,容易受到環(huán)境條件變化的影響,發(fā)生遺傳變異。據(jù)統(tǒng)計(jì),細(xì)菌自發(fā)突變的頻率為10?10~10?8。人為地利用各種物理、化學(xué)誘變因子處理微生物,可以促進(jìn)其發(fā)生變異,提高變異率。微生物容易變異的特性雖然為選用優(yōu)良菌種提供了方便,但也給優(yōu)良菌種的保藏帶來了困難。
微生物具有強(qiáng)大的分解能力和細(xì)胞物質(zhì)合成能力,可以在簡單的營養(yǎng)基質(zhì)中生長,除了少數(shù)特殊類型外,大多數(shù)微生物很容易在人為提供的環(huán)境中進(jìn)行人工培養(yǎng)。因此,可以利用微生物的這一特性來生產(chǎn)人們所需的物質(zhì)。
1.1.3 代謝旺盛
微生物雖然個(gè)體很小,但“胃口”卻很大,能“吃”會(huì)“拉”,代謝能力非常強(qiáng),素有“小型化工廠”之稱。從單位質(zhì)量來看,微生物的代謝強(qiáng)度比高等動(dòng)物大幾千到幾萬倍。例如,1kg酒精酵母1d內(nèi)能消耗掉幾千克糖,轉(zhuǎn)變成乙醇。從工業(yè)生產(chǎn)的角度來看,微生物能夠?qū)⒒|(zhì)較多地轉(zhuǎn)變?yōu)橛杏玫漠a(chǎn)品。例如,用乳酸菌生產(chǎn)乳酸,每個(gè)細(xì)胞(菌體)可以產(chǎn)生其菌體質(zhì)量103~104倍的乳酸。
代謝旺盛的另一個(gè)表現(xiàn)形式就是微生物的代謝類型非常多,而且有些是動(dòng)植物不具有的,如生物固氮作用等。
在生產(chǎn)實(shí)踐中,應(yīng)用微生物的這個(gè)特點(diǎn),不但可以獲得種類繁多的發(fā)酵產(chǎn)品,而且可以找到比較簡單的生產(chǎn)工藝。在理論研究上,可以更好地揭示生命的本質(zhì)。但是,在食品衛(wèi)生方面,在食品遇到腐敗微生物的發(fā)酵過程中發(fā)生了污染,微生物代謝越旺盛,則污染就越嚴(yán)重。如果病原微生物在人和動(dòng)物體內(nèi)代謝旺盛的話,將會(huì)引發(fā)各種傳染性疾病。
1.1.4 適應(yīng)性強(qiáng)、易變異
微生物對(duì)外界環(huán)境條件具有很強(qiáng)的適應(yīng)能力,有些微生物在其身體外面形成保護(hù)層,以提高自己對(duì)外界環(huán)境的抵抗力。微生物有極其靈活的適應(yīng)性,這是高等動(dòng)植物所無法比擬的。
微生物的個(gè)體一般都是單細(xì)胞、簡單多細(xì)胞或非細(xì)胞的。它們通常都是單倍體,加之它們具有繁殖快、數(shù)量多和與外界直接接觸等特點(diǎn),即使其變異頻率十分低,也可以在較短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量后代。最常見的變異形式是基因突變,涉及許多方面,包括形態(tài)結(jié)構(gòu)、代謝途徑、生理類型,以及代謝產(chǎn)物的質(zhì)和量等的變異。在生產(chǎn)實(shí)踐中,常利用這個(gè)特點(diǎn)來保藏菌種和誘變育種。例如,人們常常利用物理或化學(xué)的因素迫使微生物誘變,從而改變它的遺傳性質(zhì)和代謝途徑,使其適應(yīng)新的人為的環(huán)境條件,以滿足人類生產(chǎn)生活的需要。
1.1.5 食譜雜、易培養(yǎng)
微生物利用物質(zhì)的能力很強(qiáng),例如,蛋白質(zhì)、糖類及無機(jī)鹽、纖維素、石油、塑料等。另外,有一些對(duì)動(dòng)植物有毒的物質(zhì),例如,氰、酚、聚氯聯(lián)苯等,也有一些微生物能對(duì)付它們。
容易培養(yǎng)。由于微生物的食譜較雜,它們對(duì)營養(yǎng)的要求一般不高,培養(yǎng)基原料來源廣泛,因而容易培養(yǎng)。許多不易被人和動(dòng)植物所利用的農(nóng)副產(chǎn)品、工廠下腳料,如麩皮、酒糟、醬渣等都可以用來培養(yǎng)微生物。從效益角度來講,不僅解決了微生物培養(yǎng)的原料問題,還為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的廢料處理找到了出路,做到了綜合利用,變廢為寶,大大提高了經(jīng)濟(jì)效益。另外,大多數(shù)微生物反應(yīng)條件溫和,一般能在常溫常壓下生長繁殖,進(jìn)行各種新陳代謝和生命活動(dòng),不需要復(fù)雜昂貴的設(shè)備。除此之外,微生物培養(yǎng)不受季節(jié)、氣候的影響,因而,可以長年累月地進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。
總而言之,微生物的這些特點(diǎn)使其在生物界中占據(jù)了特殊的地位。它們不但被廣泛地用于生產(chǎn)實(shí)踐,而且已成為進(jìn)行生命科學(xué)研究的理想材料,從而推動(dòng)和加快了生命科學(xué)研究的發(fā)展進(jìn)程。特別是在當(dāng)今的新技術(shù)浪潮中,微生物學(xué)作為理論基礎(chǔ)更加受到人們的重視,新的成果不斷涌現(xiàn),微生物工程也作為生物工程的突破口而得到迅速發(fā)展。
1.2 微生物與人類的關(guān)系
雖然微生物的個(gè)體小到肉眼難以分辨的程度,但它們?cè)谧匀唤缰邪缪莸慕巧珔s是舉足輕重的。微生物在自然界中所起的最重要的作用是其分解功能,它們分解生物圈內(nèi)存在的動(dòng)物、植物和微生物殘?bào)w等復(fù)雜有機(jī)物質(zhì),并最后將其轉(zhuǎn)化成最簡單的無機(jī)物,供植物等其他生物利用。
微生物參與所有物質(zhì)的循環(huán)。微生物也是自然界生態(tài)系統(tǒng)中化合物的初級(jí)生產(chǎn)者。有些微生物可像植物一樣,直接利用太陽能作為能源,將簡單的無機(jī)物合成有機(jī)化合物;也有些微生物以無機(jī)物氧化產(chǎn)生的化學(xué)能作為能量來源,以無機(jī)物為原料合成有機(jī)化合物。微生物的這一特性使人類有可能擺脫土地資源的束縛,實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展。微生物通過感染植物與動(dòng)物,以控制它們的群體增長水平。
微生物對(duì)人類生活的有益影響在食品方面尤為突出。例如,人們?nèi)粘I钪行枰奈毒⑨u油、醋等調(diào)味品均是微生物發(fā)酵的產(chǎn)物;白酒、啤酒、葡萄酒等酒類及有些飲料也是微生物發(fā)酵的產(chǎn)物;面團(tuán)經(jīng)微生物生長產(chǎn)氣,可制成松軟可口的饅頭或面包。近年來,利用微生物生產(chǎn)活性多糖、功能性低聚糖等被廣泛關(guān)注,這些產(chǎn)品對(duì)改善人類生活質(zhì)量、提高人們的健康水平等有非常重要的作用。大型真菌如各種蘑菇、木耳、銀耳,具有藥用價(jià)值的靈芝、冬蟲夏草也都是微生物,為人類高檔保健食品。微生物對(duì)人體健康至關(guān)重要。
在工業(yè)方面,利用微生物發(fā)酵可生產(chǎn)各種有機(jī)酸、維生素、酶制劑等重要的食品添加劑,各類抗生素及多種工業(yè)有機(jī)合成所需的原料。
在農(nóng)業(yè)方面,利用微生物的固氮作用可產(chǎn)生農(nóng)作物生長所需的含氮化合物,利用微生物產(chǎn)生的生物農(nóng)藥可防治農(nóng)業(yè)害蟲,避免了生產(chǎn)、使用化肥、農(nóng)藥造成的環(huán)境污染,是農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要保證。利用這些微生物防治農(nóng)林害蟲,可以減少農(nóng)藥的使用量,減輕對(duì)環(huán)境的污染。
水域污染治理的生物學(xué)的處理方法具有經(jīng)濟(jì)方便、效果好的突出優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用。有些微生物能將水中的含碳有機(jī)物分解成二氧化碳等氣體;將含氮有機(jī)物分解成氨、硝酸等物質(zhì);將汞、砷等對(duì)人體有毒的重金屬鹽在水體中進(jìn)行轉(zhuǎn)化,以便回收或除去。利用一些微生物將農(nóng)作物的秸稈及人、畜糞便等有機(jī)物進(jìn)行發(fā)酵,獲得沼氣。
微生物在食品、工業(yè)產(chǎn)品等上面的生長將導(dǎo)致它們品質(zhì)的變化,甚至使它們失去使用價(jià)值,從而給人類的生命財(cái)產(chǎn)造成巨大的損失。但隨著科學(xué)的發(fā)展和人們認(rèn)識(shí)的進(jìn)一步深入,微生物對(duì)人類社會(huì)的危害作用將會(huì)越來越小。
1.3 微生物學(xué)的發(fā)展簡史
自古以來,人類在日常生活和生產(chǎn)實(shí)踐中,已經(jīng)覺察到微生物的生命活動(dòng)及其所發(fā)生的作用。
因?yàn)槲⑸锖苄,?gòu)造又簡單,所以人們?nèi)菀壮浞终J(rèn)識(shí)它,并將其發(fā)展成為一門學(xué)科。與其他學(xué)科比起來,微生物學(xué)的發(fā)展還是很晚的,是從有顯微鏡開始的。微生物學(xué)發(fā)展經(jīng)歷了3個(gè)時(shí)期:形態(tài)學(xué)時(shí)期、生理學(xué)時(shí)期和現(xiàn)代微生物學(xué)的發(fā)展。
1.3.1 形態(tài)學(xué)時(shí)期
17世紀(jì),荷蘭人列文虎克(Antony van Leeuwenhoek,1632~1723年)用自制的簡單顯微鏡(可放大160~260倍)觀察牙